GDSBio NGS Library Construction Fast DNA Library Plus Prep Kit สำหรับ MGI
รายละเอียดสินค้า:
สถานที่กำเนิด: | จีน |
ชื่อแบรนด์: | GDSBio |
ได้รับการรับรอง: | ISO9001, ISO13485 |
หมายเลขรุ่น: | KM004-A, KM004-B |
การชำระเงิน:
จำนวนสั่งซื้อขั้นต่ำ: | 1 กล่อง |
---|---|
รายละเอียดการบรรจุ: | บรรจุภัณฑ์ขนาดเล็กหรือจำหน่ายจำนวนมากหรือ OEM |
เวลาการส่งมอบ: | 8 วันทำงาน |
เงื่อนไขการชำระเงิน: | L/C, D/A, D/P, T/T, Western Union, MoneyGram |
สามารถในการผลิต: | 10,000 กล่อง/กล่องต่อวัน |
ข้อมูลรายละเอียด |
|||
คลังสินค้า: | ใช่ | แมว. เลขที่: | KM004-A, KM004-B |
---|---|---|---|
ข้อมูลจำเพาะ: | KM004-A/24 rxns; KM004-B/96 rxns | รูปร่าง: | ของเหลวใส |
การพิมพ์โลโก้: | ด้วยการพิมพ์โลโก้ | แพ็คเกจการขนส่ง: | การบรรจุ |
อายุการเก็บรักษา: | 12 เดือน | สภาพการเก็บรักษา: | เก็บที่อุณหภูมิห้อง (15-25°C) และขนส่งที่อุณหภูมิห้อง |
แสงสูง: | ชุดสกัดกรดนิวคลีอิกไวรัส RNA,ชุดสกัดกรดนิวคลีอิกไวรัส DNA,ชุดสกัด Swab rna |
รายละเอียดสินค้า
ห้องสมุด DNA ที่รวดเร็วบวกชุดเตรียมสำหรับ MGI
[ชื่อผลิตภัณฑ์]
Fast DNA Library Plus Prep Kit สำหรับ MGI
[แมว.No./Spec.]
KM004-A/24 rxns;KM004-B/96 rxns;กระสอบตัวอย่าง/ 6 rxns
[รายละเอียดสินค้า]
ชุดนี้มุ่งเป้าไปที่แพลตฟอร์มการหาลำดับปริมาณงานสูงของ MGI ให้รูปแบบการสร้างไลบรารี DNA ที่สะดวกและเป็นสากลในหลอดเดียวรวมการแยกส่วน การซ่อมแซมส่วนปลาย และ A-Tailing เข้าไว้ในขั้นตอนเดียว ทำให้ลดเวลาในการสร้างห้องสมุดลงได้อย่างมาก และลดข้อผิดพลาดที่เกิดจากขั้นตอนที่น่าเบื่อหลังจากการแยกส่วนและการเตรียมขั้นสุดท้าย ผลิตภัณฑ์สามารถเชื่อมต่อโดยตรงกับอะแดปเตอร์โดยไม่ต้องทำให้บริสุทธิ์เพิ่มเติม และขั้นตอนที่ตามมาจะเหมือนกับ #KM001 Fast DNA Library Prep Kit สำหรับ MGIการหาปริมาณไลบรารีแบบสมบูรณ์สามารถทำได้ด้วยวิธี dsDNA fluorescent dye (เช่น Thermo Qubit Flex Fluorometer) หรือ PCR การหาปริมาณแบบสัมบูรณ์ หลังจากเจือจางไลบรารีให้มีความเข้มข้นที่เหมาะสม
[ประเภทตัวอย่าง]
ตารางที่ 1 อินพุตที่แนะนำสำหรับ DNA ทั่วไป
แอปพลิเคชัน | ประเภทตัวอย่าง | ปริมาณที่แนะนำ |
การหาลำดับจีโนมทั้งหมด | จีโนมที่ซับซ้อนคุณภาพสูง | 50ng-1μg |
ลำดับการจับเป้าหมายของ exome ทั้งหมด | จีโนมที่ซับซ้อนคุณภาพสูง | 10ng-1μg |
ลำดับการจับเป้าหมายของจีโนมทั้งหมด | FFPE ดีเอ็นเอ | ≥50ng |
การหาลำดับจีโนมทั้งหมด | จีโนมของจุลินทรีย์ | 1ng-1μg |
[สภาพการเก็บรักษาและอายุการเก็บรักษา]
รีเอเจนต์ทั้งหมดควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20°CLigation Buffer เป็นเรื่องปกติที่คริสตัลจะตกตะกอนที่อุณหภูมิต่ำ ควรปรับให้สมดุลกับอุณหภูมิห้องก่อนใช้งานสินค้ามีอายุ 12 เดือน
[ส่วนประกอบ]
ส่วนประกอบ | 24 rxns | 96 rxns |
บัฟเฟอร์ FEP | 120 มล | 480 มล |
FEP เอนไซม์ผสม | 240 มล | 2×480 ไมโครลิตร |
DNA Ligase ที่รวดเร็ว | 120 มล | 2×240 ไมโครลิตร |
บัฟเฟอร์ Ligation อย่างรวดเร็ว | 600 มล | 4×600 ไมโครลิตร |
2 × HIFI Library PCR Master Mix | 600 มล | 4×600 ไมโครลิตร |
ไพรเมอร์ผสมสำหรับ MGI * | 120 มล | 480 มล |
บัฟเฟอร์การวางตัวเป็นกลาง | 120 มล | 480 มล |
*บัฟเฟอร์ FEP เป็นบัฟเฟอร์ปฏิกิริยาการเตรียมการแยกส่วนและสิ้นสุดFEP Enzyme Mix เป็นส่วนผสมของเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับการแยกส่วนและการเตรียมขั้นสุดท้าย
* หากมีมากกว่าหนึ่งตัวอย่าง แนะนำให้ใช้ #KM002 และ #KM003 อะแด็ปเตอร์ไพรเมอร์ผสมชุดนี้มีชุดไพรเมอร์ ลำดับไพรเมอร์มีดังนี้:
5'-TGTGAGCCAAGGAGTTG-3'
5'-GAACGACATTGGCTACGA-3'
หมายเหตุ: เม็ดบีดสำหรับการเลือกที่แนะนำ: #NC1011 GDSPure DNA Selection Magbeads หรือเม็ดบีด AMPure XP
[หมายเหตุ]
1. เรามีชุดไพรเมอร์ Universal Adapter สองประเภท (อะแดปเตอร์ GDS, #KM002 และ #KM003 ซื้อแยกต่างหาก) แต่ลูกค้ายังสามารถเลือกจากผู้ผลิตรายอื่นหรือสังเคราะห์อะแดปเตอร์ของตนเองสำหรับแพลตฟอร์มลำดับ MGIAdapter มากเกินไปจะนำไปสู่การสร้าง Adapter dimer และ Adapter ที่ไม่เพียงพอจะทำให้เอาต์พุตไลบรารีเหลือน้อยดังนั้นความเข้มข้นของ Adapter ที่เหมาะสมจะเป็นตัวกำหนดความเข้มข้นและคุณภาพของไลบรารีความเข้มข้นของอะแด็ปเตอร์ที่แนะนำสำหรับอินพุต DNA ในปริมาณต่างๆ แสดงไว้ในตารางต่อไปนี้:
ตารางที่ 2 ความเข้มข้นในการใช้งานที่แนะนำของอะแดปเตอร์
การป้อนข้อมูลดีเอ็นเอ | ข้อแนะนำที่แนะนำสำหรับอแดปเตอร์ | อะแดปเตอร์: ใส่อัตราส่วนโมล | องศาการเจือจางอะแดปเตอร์ GDS* |
1μg | 10μM | 10:1 | ไม่มีการเจือจาง |
500ng | 10μM | 20:1 | ไม่มีการเจือจาง |
250ng | 10μM | 40:1 | ไม่มีการเจือจาง |
100ng | 7.5μM | 100:1 | 3:4 |
50ng | 5μM | 200:1 | 1:2 |
25 ก | 2.5μM | 200:1 | 1:4 |
1 วัน | 1μM | 200:1 | 1:10 |
* แสดงเป็นอัตราส่วนปริมาตรของอะแดปเตอร์ต่อสารเจือจาง
2. เอนไซม์ที่ใช้ใน 2× HIFI Library PCR Master Mix คือ DNA polymerase ตระกูล B ซึ่งมีพอลิเมอเรส 5 '-3' และกิจกรรม exonuclease 3 '-5' แต่ไม่มีกิจกรรม exonuclease 5 '-3'มีความเที่ยงตรงสูงและเป็นเนื้อเดียวกัน และมีความสามารถในการสังเคราะห์ที่ยั่งยืนการควบคุมจำนวนรอบการขยายอย่างเข้มงวดมีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับเอาต์พุตของไลบรารีตารางต่อไปนี้แสดงจำนวนรอบการขยายสัญญาณที่แนะนำซึ่งสอดคล้องกับปริมาณ DNA ที่ป้อนเข้าที่แตกต่างกัน:
ตารางที่ 3 จำนวนรอบการขยายสัญญาณที่แนะนำซึ่งสอดคล้องกับอินพุตตัวอย่างต่างๆ
ใส่ดีเอ็นเอ | จำนวนรอบการขยายสัญญาณที่แนะนำ | |
ห้องสมุด 100ng | ห้องสมุด1μg | |
1μg | 0 | 2-5 |
500ng | 0 | 2-5 |
250ng | 1-3 | 5-7 |
100ng | 2-4 | 6-8 |
50ng | 4-6 | 8-10 |
25 ก | 5-7 | 9-12 |
10ng | 7-9 | 11-13 |
5 น | 9-11 | 13-14 |
2.5ng | 10-12 | 14-16 |
1 วัน | 11-13 | 15-17 |
หมายเหตุ: 1. ตารางด้านบนแสดงผลการทดสอบโดยใช้ DNA มาตรฐาน 150bp ซึ่งใช้สำหรับการอ้างอิงเท่านั้น
2. หากใช้ตัวเชื่อมต่อที่ไม่สมบูรณ์ ควรขยายจำนวนรอบขั้นต่ำ (1-3) เพื่อให้ได้ไลบรารีที่สมบูรณ์
3. หากคุณภาพของ DNA ที่ป้อนไม่ดี หรือมีการเลือกขนาดในระหว่างการก่อสร้างห้องสมุด ควรเพิ่มจำนวนรอบการขยายสัญญาณอย่างเหมาะสม
[กระบวนการสร้างห้องสมุดมาตรฐาน]
การแยกส่วนและการซ่อมแซมจุดสิ้นสุด
1. กำหนดองค์ประกอบของตัวทำละลายของแม่แบบ DNA หากไม่มี EDTA ให้ดำเนินการโดยตรงไปยังขั้นตอนที่ 2หากมี EDTA ควรใช้เม็ดแม่เหล็ก 2.2 เท่าในการทำให้บริสุทธิ์ หรือควรเพิ่มปริมาตรของบัฟเฟอร์การทำให้บริสุทธิ์ที่สอดคล้องกันตามเนื้อหาของ EDTA ในตารางต่อไปนี้สำหรับการทำให้เป็นกลาง:
EDTA Conc. | ปริมาณของบัฟเฟอร์การวางตัวเป็นกลาง |
1 มม | 5 ไมโครลิตร |
0.8ม | 4 ไมโครลิตร |
0.6ม | 3 ไมโครลิตร |
0.5ม | 2.5 ไมโครลิตร |
0.4ม | 2 ไมโครลิตร |
0.2 มม | 1 ไมโครลิตร |
0.1ม | 0.5 ไมโครลิตร |
<0.1มิลลิโมลาร์ | 0 ไมโครลิตร |
2. เตรียมปฏิกิริยาต่อไปนี้ในหลอด PCR ขนาด 200 ไมโครลิตร:
รีเอเจนต์ | ปริมาณ |
ใส่ดีเอ็นเอ | X ไมโครลิตร |
บัฟเฟอร์ FEP | 5 ไมโครลิตร |
บัฟเฟอร์การวางตัวเป็นกลาง | Y ไมโครลิตร |
วว2อ | ถึง 65 ไมโครลิตร |
3. เติม FEP Enzyme Mix 10 μl ลงในระบบข้างต้น เป่าให้ทั่ว ปั่นแยกเป็นเวลาสั้นๆ และใส่ลงในเครื่องมือ PCR ทันทีสำหรับปฏิกิริยาต่อไปนี้:
อุณหภูมิ | เวลา |
20°ซ | 15 นาที |
37°ซ | อ้างถึงตารางที่ 4 |
65°ซ | 15 นาที |
4°ซ | ∞ |
ตารางที่ 4 ระยะเวลาที่จำเป็นในการรับห้องสมุดขนาดต่างๆ
ขนาดชิ้นส่วน | เวลา |
150bp | 20-30นาที |
250bp | 15-20นาที |
350bp | 10-15นาที |
550bp | 6-10นาที |
อแดปเตอร์ แอลปฏิกิริยา
1. ดำเนินการปฏิกิริยา ligation โดยเร็วที่สุดหลังจากการแยกส่วนและการเตรียมการสิ้นสุด
2. เจือจางอะแดปเตอร์ตามตารางที่ 2
3. เตรียมระบบปฏิกิริยาต่อไปนี้:
รีเอเจนต์ | ปริมาณ |
สินค้าข้างต้น | 50 มล |
บัฟเฟอร์ Ligation อย่างรวดเร็ว | 25 มล |
DNA Ligase ที่รวดเร็ว | 5 ไมโครลิตร |
อะแดปเตอร์ X สำหรับ MGI | 5 ไมโครลิตร |
วว2อ | 15 มล |
ทั้งหมด | 100 มล |
4. หมุนวนเบา ๆ และหมุนสั้น ๆ เพื่อให้ส่วนผสมเข้ากันดี หมุนเหวี่ยงสั้น ๆ แล้วรวบรวมของเหลวทั้งหมดไปที่ด้านล่างของหลอด
5. ทำปฏิกิริยาต่อไปนี้ในวงจรความร้อน:
อุณหภูมิ | เวลา |
20°ซ | 15 นาที |
4°ซ | ∞ |
ที่แนะนำสทางออกสำหรับการล้าง PCR/การเลือกขนาด(ควรปรับปริมาตรเม็ดแม่เหล็กเฉพาะตามตัวอย่างจริงขนาด)
1. เตรียมผลิตภัณฑ์ ligation 100 ไมโครลิตรลงในหลอดปั่นแยกที่เหมาะสม
2. เติมเม็ดแม่เหล็กสำหรับการเลือก DNA ที่แขวนลอยใหม่ 100 ไมโครลิตรลงในตัวอย่างค่อยๆ เป่าด้วยปิเปต 10 ครั้ง (หรือกระแสน้ำวนเป็นเวลา 30 วินาที)บ่มตัวอย่างเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง
3. วางท่อบนชั้นวางแม่เหล็กที่เหมาะสมเพื่อแยกเม็ดบีดออกจากส่วนเหนือตะกอนเมื่อสารละลายใสแล้ว ให้ค่อยๆ ถอดและทิ้งส่วนเหนือตะกอนด้วยปิเปต (อย่าทิ้งเม็ดบีดส์)
4. เติมเอทานอล 80% ที่เตรียมขึ้นใหม่ 200 ไมโครลิตรลงในหลอดในขณะที่อยู่ในชั้นวางแม่เหล็กบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 วินาที จากนั้นนำส่วนเหนือตะกอนออกอย่างระมัดระวังและทิ้งไป (อย่ารบกวนเม็ดบีดส์)
5. ทำซ้ำขั้นตอนที่ 4 หนึ่งครั้งสำหรับการซักทั้งหมดสองครั้ง
หมายเหตุ: ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้เอาของเหลวที่มองเห็นออกทั้งหมดหลังจากการซักครั้งที่สอง
6. ผึ่งลมให้เม็ดแม่เหล็กแห้งจนพื้นผิวของเม็ดแม่เหล็กไม่มีความมันเงาชัดเจน ขณะที่หลอดอยู่บนชั้นวางแม่เหล็กโดยเปิดฝาไว้
หมายเหตุ: อย่าทำให้เม็ดบีดแห้งเกินไป อาจส่งผลให้การฟื้นตัวของ DNA ลดลงเมื่อลูกปัดเริ่มแตกแสดงว่าแห้งเกินไป
7. ถอดท่อออกจากชั้นวางแม่เหล็กเติมบัฟเฟอร์การชะ 22 ไมโครลิตร (10 มิลลิโมลาร์ Tris-HCl, pH8.0-8.5) ลงในหลอดผสมให้เข้ากันโดยการปิเปตขึ้นและลงอย่างน้อย 10 ครั้งหรือบนเครื่องผสมน้ำวนเป็นเวลา 30 วินาทีบ่มเป็นเวลา 3-5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง
8. วางท่อบนชั้นวางแม่เหล็กหลังจากผ่านไป 5 นาที (หรือเมื่อสารละลายใส) ให้ย้ายสารลอยเหนือตะกอน 20 ไมโครลิตรไปยังหลอดใหม่การเลือกเสร็จสิ้น และสามารถใช้ DNA ที่เลือกสำหรับการทดลองในภายหลังหรือเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20°C เป็นเวลานาน
การขยายห้องสมุด
1. เตรียมปฏิกิริยาต่อไปนี้ในหลอด PCR:
รีเอเจนต์ | ปริมาณ |
ผลิตภัณฑ์ Ligation หลังจากการล้างข้อมูลหรือการเลือกขนาด | 20 มล |
2 × HIFI Library PCR Master Mix | 25 มล |
ไพรเมอร์ผสมสำหรับ MGI | 5 ไมโครลิตร |
ทั้งหมด | 50 มล |
2. หมุนวนเบา ๆ และหมุนสั้น ๆ เพื่อให้ส่วนผสมเข้ากันดี หมุนเหวี่ยงสั้น ๆ และรวบรวมของเหลวทั้งหมดไปที่ด้านล่างของหลอด
3. ทำปฏิกิริยาต่อไปนี้ในวงจรความร้อน:
อุณหภูมิ | เวลา | หมายเลขไซเคิล |
95°ซ | 3 นาที | 1 |
98°ซ | 20 วินาที |
เลือกจำนวนรอบที่เหมาะสมตามตารางที่ 3 |
60°ซ | 15 วินาที | |
72°ซ | 30 วินาที | |
72°ซ | 5 นาที | 1 |
4°ซ | ∞ | - |
ที่แนะนำสทางออกสำหรับการล้าง PCR/การเลือกขนาด(ควรปรับปริมาตรเม็ดแม่เหล็กเฉพาะตามตัวอย่างจริงขนาด)
1. เตรียมผลิตภัณฑ์ ligation 50 ไมโครลิตรลงในหลอดปั่นแยกที่เหมาะสม
2. เติมเม็ดแม่เหล็กสำหรับการเลือก DNA ที่แขวนลอยใหม่ 45 ไมโครลิตรลงในตัวอย่างค่อยๆ เป่าด้วยปิเปต 10 ครั้ง (หรือกระแสน้ำวนเป็นเวลา 30 วินาที)บ่มตัวอย่างเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง
3. วางท่อบนชั้นวางแม่เหล็กที่เหมาะสมเพื่อแยกเม็ดบีดออกจากส่วนเหนือตะกอนเมื่อสารละลายใสแล้ว ให้ค่อยๆ ถอดและทิ้งส่วนเหนือตะกอนด้วยปิเปต (อย่าทิ้งเม็ดบีดส์)
4. เติมเอทานอล 80% ที่เตรียมขึ้นใหม่ 200 ไมโครลิตรลงในหลอดในขณะที่อยู่ในชั้นวางแม่เหล็กบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 วินาที จากนั้นนำส่วนเหนือตะกอนออกอย่างระมัดระวังและทิ้งไป (อย่ารบกวนเม็ดบีดส์)
5. ทำซ้ำขั้นตอนที่ 4 หนึ่งครั้งสำหรับการซักทั้งหมดสองครั้ง
หมายเหตุ: ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้เอาของเหลวที่มองเห็นออกทั้งหมดหลังจากการซักครั้งที่สอง
6. ผึ่งลมให้เม็ดแม่เหล็กแห้งจนพื้นผิวของเม็ดแม่เหล็กไม่มีความมันเงาชัดเจน ขณะที่หลอดอยู่บนชั้นวางแม่เหล็กโดยเปิดฝาไว้
หมายเหตุ: อย่าทำให้เม็ดบีดแห้งเกินไป อาจส่งผลให้การฟื้นตัวของ DNA ลดลงเมื่อลูกปัดเริ่มแตกแสดงว่าแห้งเกินไป
7. ถอดท่อออกจากชั้นวางแม่เหล็กเติมบัฟเฟอร์การชะ 22 ไมโครลิตร (10 มิลลิโมลาร์ Tris-HCl, pH8.0-8.5) ลงในหลอดผสมให้เข้ากันโดยการปิเปตขึ้นและลงอย่างน้อย 10 ครั้งหรือบนเครื่องผสมน้ำวนเป็นเวลา 30 วินาทีบ่มเป็นเวลา 3-5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง
8. วางท่อบนชั้นวางแม่เหล็กหลังจากผ่านไป 5 นาที (หรือเมื่อสารละลายใส) ให้ย้ายสารลอยเหนือตะกอน 20 ไมโครลิตรไปยังหลอดใหม่การคัดเลือกเสร็จสิ้นแล้ว และ DNA ที่เลือกสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2-8°C เป็นเวลา 1-2 สัปดาห์ หรือเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20°C เป็นเวลานาน
[ภาคผนวก]รูปแบบที่แนะนำสำหรับการเลือกสองด้าน
หากจำเป็นต้องเลือกแบบสองรอบ เรามีรูปแบบต่อไปนี้เพื่อเลือกปริมาตรเม็ดแม่เหล็กที่เหมาะสมตามขนาดไลบรารีที่คาดไว้สามารถเลือกขนาดได้ก่อนสิ้นสุดการซ่อมหรือหลังการขยายเสียงการเลือกสองรอบหรือมากกว่าสองรอบจะลดผลตอบแทนของไลบรารีลงอย่างมาก
เติมปริมาตรไลบรารีในตารางด้านล่างเป็น 100 μlเลือกปริมาตรของเม็ดแม่เหล็กในสองรอบตามขนาดไลบรารีที่ต้องการและดำเนินการเลือกตามคำแนะนำต่อไปนี้
ตารางที่ 5 จำนวนเม็ดแม่เหล็กที่แนะนำสำหรับการเลือกแบบสองรอบ
ขนาดไลบรารีที่คาดหวัง | 150bp | 200bp | 250bp | 300bp | 400bp | 500bp | 600bp | 700bp | |
ปริมาณลูกปัด(ไมโครลิตร) | รอบที่ 1 | 100 | 90 | 80 | 70 | 60 | 55 | 50 | 45 |
รอบที่ 2 | 30 | 20 | 20 | 20 | 20 | 15 | 15 | 15 |
1. เติมปริมาตรไลบรารีเป็น 100 ไมโครลิตรในหลอด PCR ขนาด 200 ไมโครลิตร และระบุเป็น A เติมเม็ดแม่เหล็กตามตารางที่ 5 (รอบที่ 1) ตามตารางที่ 1 ลงในหลอด A ค่อยๆ เป่าด้วยปิเปตเป็นเวลา 30 วินาทีบ่มตัวอย่างเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง
2. วางท่อ A บนชั้นวางแม่เหล็กที่เหมาะสมเพื่อแยกเม็ดบีดออกจากส่วนเหนือตะกอนเมื่อสารละลายใสแล้ว ให้นำส่วนเหนือตะกอนออกอย่างระมัดระวังในหลอดใหม่และติดป้ายว่า B. ทิ้งเม็ดบีดส์
3. เพิ่มปริมาณเม็ดแม่เหล็กตามตารางที่ 5 (รอบที่ 2) ลงในหลอด B เป่าปิเปตเบาๆ เป็นเวลา 30 วินาทีบ่มตัวอย่างเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้องวางท่อ B บนชั้นวางแม่เหล็กเมื่อสารละลายใสแล้ว ให้ค่อยๆ ขจัดและทิ้งส่วนเหนือตะกอนอย่างระมัดระวัง
4. เติมเอทานอล 80% ที่เตรียมขึ้นใหม่ 200 ไมโครลิตรลงในหลอด B ในขณะที่อยู่ในชั้นวางแม่เหล็กบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 วินาที จากนั้นนำส่วนเหนือตะกอนออกอย่างระมัดระวังและทิ้งไป (อย่ารบกวนเม็ดบีดส์)
5. ทำซ้ำขั้นตอนที่ 6 หนึ่งครั้งรวมการซักสองครั้ง
หมายเหตุ: ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้เอาของเหลวที่มองเห็นออกทั้งหมดหลังจากการซักครั้งที่สอง
6. ผึ่งลมให้เม็ดแม่เหล็กแห้งจนพื้นผิวของเม็ดแม่เหล็กไม่มีความมันเงาชัดเจน ขณะที่หลอด B อยู่บนชั้นวางแม่เหล็กโดยเปิดฝาไว้
หมายเหตุ: อย่าทำให้เม็ดบีดแห้งเกินไป อาจส่งผลให้การฟื้นตัวของ DNA ลดลงเมื่อลูกปัดเริ่มแตกแสดงว่าแห้งเกินไป
7. ถอดท่อ B ออกจากชั้นวางแม่เหล็กเติมบัฟเฟอร์การชะ 22 ไมโครลิตรลงในหลอดผสมให้เข้ากันโดยการปิเปตขึ้นและลงอย่างน้อย 10 ครั้งหรือบนเครื่องผสมน้ำวนเป็นเวลา 30 วินาทีบ่มเป็นเวลา 3-5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง
หมายเหตุ: หากไม่ดำเนินการจับเป้าหมาย ให้เพิ่มบัฟเฟอร์การชะ (10mM Tris-HCl, ph 8.0-8.5) สำหรับการชะมิฉะนั้นควรใช้น้ำบริสุทธิ์พิเศษที่ผ่านการฆ่าเชื้อเพื่อชะล้าง
- วางท่อ B บนชั้นวางแม่เหล็กถ่ายโอนสารเหนือตะกอน 20 ไมโครลิตรไปยังหลอดใหม่
เพื่อใช้ในการวิจัยเท่านั้น
GDSBio เป็นองค์กรเทคโนโลยีขั้นสูงที่มุ่งเน้นไปที่การวิจัยและพัฒนา การผลิตและการขายผลิตภัณฑ์ด้านชีววิทยาศาสตร์คุณภาพสูงบริษัทมีสายผลิตภัณฑ์ที่สมบูรณ์ โดยมีเทคโนโลยี PCR เป็นแกนหลัก โดยเน้นไปที่ PCR ทั่วไป, PCR เชิงปริมาณเรืองแสง, การจัดเก็บ NGS, อิเล็กโทรโฟรีซิสของกรดนิวคลีอิก และเทคโนโลยีอณูชีววิทยาอื่นๆ และได้พัฒนารีเอเจนต์สำหรับการวิจัยระดับโมเลกุล วัตถุดิบการวินิจฉัยระดับโมเลกุลในหลอดทดลอง รีเอเจนต์การสกัดและตรวจจับกรดนิวคลีอิกและผลิตภัณฑ์อื่นๆ